Manuel de prélèvement

Généralité sur les prélèvements en Hématologie-Hémostase

Il est important que tout prélèvement soit accompagné d’une demande d’examen correctement remplie.
Signaler sur le bon de demande les examens effectués dans le cadre d’un protocole.
(Informer le laboratoire de tout nouveau protocole).

Indiquer de façon claire les traitements anticoagulants

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Recommandations pour l'hématologie

Se reporter aux critères d’acceptation : annexe N°1.

Vitesse de sédimentation : coller l’étiquette du patient dans la longueur du tube.

Cytométrie de flux, Biologie moléculaire

Prendre rendez-vous avec le laboratoire du Centre Hospitalier de Lisieux quelques jours avant le prélèvement, afin que le laboratoire du CHU donne son accord (intermédiaire obligatoire).

Se reporter à la liste des examens pour connaître les conditions de prélèvement en fonction de la population à étudier.

Étude du globule rouge

Electrophorèse de l’hémoglobine : NFS et ferritine simultanément.
Notion de transfusion de moins de 3 mois à préciser, ainsi que l’origine géographique du patient sur le bon de demande.
G6PD/PK : joindre des renseignements cliniques (comme pour l’électrophorèse de l’hémoglobine).
Attention à ne pas confondre pyruvate kinase (enzyme du globule rouge) avec dosage de pyruvate en chimie.

Test de Kleihauer

Les tests de Kleihauer arrivant pendant la garde sans précisions cliniques seront lus par le biologiste le lendemain.
En cas de demande urgente, appeler le biologiste d'astreinte

Demande de caryotype / Cytométrie de flux sur myélogramme

Laboratoire destinataire : Dr G. PLESSIS / Dr V. SALAÜN
Laboratoire de cytogénétique / Hématologie
CHU CAEN

  1. Prendre rendez-vous avec le laboratoire du Centre Hospitalier de Lisieux quelques jours avant le prélèvement, afin que le laboratoire du CHU donne son accord (intermédiaire obligatoire).
  2. Prélever au moins 1 ml de moelle sur un tube hépariné (bouchon vert) pour la cytogénétique et 1 ml sur tube EDTA pour la CMF (bouchon mauve).
  3. Le prélèvement doit être adressé le jour même au laboratoire, accompagné d’une lettre de renseignements cliniques.
  4. Dès que la lecture du myélogramme est effectuée, le résultat sera faxé au laboratoire de cytogénétique (n° : 02 31 27 24 57) (aucun résultat ne nous parviendra avant que le laboratoire de cytogénétique n’ait eu connaissance du résultat cytologique du myélogramme).
Selon le contexte clinique, les jours où les demandes peuvent être transmises diffèrent :
  • Caryotype pour diagnostic de dysmyélopoïèse ou leucémie :
    du lundi au jeudi (en dehors de l’urgence).
  • Caryotype pour diagnostic de myélome ou lymphome :
    lundi et vendredi
Attention à la présence éventuelle d’un jour férié la semaine suivante (si tel est le cas, téléphoner au laboratoire de cytogénétique afin qu’il valide la date pressentie).
N.B : actuellement le laboratoire de cytogénétique du CHU de CAEN ne propose pas de formulaire. Une lettre du prescripteur rassemblant les éléments cliniques et biologiques ainsi que le diagnostic suspecté est nécessaire.

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Recommandations pour l'hémostase

Se reporter aux critères d’acceptation : annexe N°2.

Dans le cas de l’utilisation d’une unité de prélèvement à ailettes (diamètre préconisé au minimum de 0,7 mm) un tube de purge doit être systématiquement utilisé au préalable (purger environ 2 ml).

Veiller au remplissage complet jusqu’au repère indiqué sur l’étiquette du tube : en cas de non-respect de cette consigne, le tube ne pourra être traité en raison d’un déséquilibre entre le volume d’anticoagulant et de sang pouvant entraîner un résultat erroné.

Le suivi des anticoagulants listés ci-dessous est effectué au laboratoire:

  • AVK (INR)
  • HNF (TCA, activité anti-Xa)
  • HPBM à dose curative (activité anti-Xa)
  • Orgaran (activité anti-Xa)
  •         => Se reporter aux fiches dédiées dans la partie "Catalogue des examens"

ARIXTRA: le traitement préventif ou curatif par Arixtra ne nécessite pas de surveillance biologique. En cas de nécessité de dosage, sous-traitance possible, contacter le laboratoire (prélever 2 à 3H après l'injection).

Les AOD ou NACO (anticoagulants directs oraux) = XARELTO, PRADAXA et ELIQUIS :

Ces anticoagulants ne nécessitent pas de surveillance biologique et des interférences sont possibles sur les tests d’hémostase standard. Un dosage spécifique peut être réalisé pour le Rivaroxaban (Xarelto) et le Dabigatran (Pradaxa). Se reporter aux fiches dédiées dans la partie "Catalogues des examens".

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Examens sur rendez vous

Les rendez vous sont à prendre au laboratoire du CH Lisieux, y compris pour les examens sous traités
(poste 3034).

Myélogramme : préciser les nom et prénom du patient, le service demandeur, l’indication.

  • Préciser si le patient est sous AVK
    (INR impérativement inférieur à 1.5 le jour du prélèvement).
  • Remplir le formulaire téléchargeable de demande de myélogramme.
    Indiquer un numéro de poste à rappeler en cas de problème.
  • Prescrire une NFS + réticulocytes le jour du myélogramme.
  • Prévoir l’application d’un patch d’Emla englobant le 1/3 supérieur su sternum, une heure avant le geste si le biologiste prélève, ainsi que la mise à disposition de gaz analgésique, type KALINOX.

Immunophénotypage (= phénotypage) des hémopathies (sur sang périphérique ou moëlle) : renseignements cliniques indispensables.

Biologie moléculaire (sur sang ou moëlle osseuse) : renseignements cliniques indispensables.

Caryotype sur myélogramme : se référer aux conditions de prélèvement (annexe N°4).

Suivi CD19-CD2O : renseignements cliniques et thérapeutiques indispensables.

CD 55-CD 59 (Hémoglobinurie nocturne paroxystique) : renseignements cliniques indispensables.

Protocole TYSABRI (CD 49d) : voir formulaire N°4.

Populations lymphocytaires sur lavage broncho-alvéolaire : acheminer le prélèvement au laboratoire avant 10H30 après avoir pris auparavant R.V. au laboratoire.


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Annexe N° 1

Critères d'acceptation et de rejet des prélèvements d'hématologie en fonction des variables pré-analytiques.

  Recommandé Acceptable Non conforme
Jeûne Petit déjeuner léger    
Tube Verre siliconé ou plastique sous vide Micro tubes pour les prélèvements capillaires Tube non sous vide Lot de tubes périmés
Anticoagulant EDTA K2 ou K3   Autres anticoagulants ou tube sec
Garrot < 1 min > 1 min  
Site de ponction Veineux : bras opposé à la perfusion Sur cathéter après rinçage Du coté et en amont de la perfusion
Place du tube Dernier tube Autre positions (influence sur le tube d’hémostase si celui-ci est prélevé après)  
Remplissage Adapté au vide (3 ml)
Micro prélèvement entre 250 et 500 µl
8 à 10 agitations douces afin d’éviter un coagulum
Inférieur au volume prévu Quantité insuffisante Inférieure à la prise d’essai de l’automate
Transport et conservation Température ambiante 4 °C  
Délai avant analyse Numération <6h
Formule <6h
Réticulocytes < 24h
  Numération > 6h
Formule> 6h
Réticulocytes > 24h
Frottis médullaire Identification des lames
Étalement immédiat en frottis mince
Séchage des frottis à l’air sans agitation
  Étalement épais avec superposition cellulaire
VS Remplissage > 90% > 80% (> 8 cm à compter du fond du tube) Quantité insuffisante si remplissage < 80%
Autre     Sang coagulé dans le tube (caillot visible ou micro coagulum)
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Annexe N° 2

Critères d'acceptation et de rejet des prélèvements d'hémostase en fonction des variables pré-analytiques.
Recommandations du G.E.H.T. pour les tests courants d’hémostase.

  Recommandé Acceptable Non conforme
Jeûne Petit déjeuner léger Autres situations  
Tubes Sous vide stériles
Verre siliconé ou PET étanche
Volume résiduel d'air <20%
Microtubes  
Anticoagulant Citrate 0,109 M (3,2%)
CTAD 0,109 M
Citrate 0,129 M (3,8%) Autres anticoagulants
Hématocrite 30% à 55% Si Hématocrite >55% ou <30%
Risque de perturbation du bilan d'hémostase
 
Taille de l'aiguille 19 à 22 gauge
(0.7 à 1mm)
23 gauge en pédiatrie
Tubulure avec volume
mort <150 pl
Autres
Garrot < 1 mn 1 à 3 mn
Nb : En cas de pose de garot > 3 mn ou de prélèvement difficile le signaler sur le bon de demande
 
Site de ponction Veineux éloigné de toute perfusion Artériel.Prélèvement sur cathéter après rejet de 5 à 10 ml Autres
Place du tube 2ème tube après tube de purge
Voir ordre des tubes
1er tube si prélèvement à l'aiguille Après tube sec avec activateur ou anticoagulant autre que Citrate
Remplissage(réévalué après centifugation au laboratoire) >90% >80% pour recherche inhibiteur F VIII <90% pour toutes les examens sauf inhibiteur F VIII
Transport et conservation 18 à 22°C position verticale si possible   <4 °C et >30°C
Délai avant test Se reporter aux fiches spécifiques dans la partie "Catalogue des examens"
Aspect du plasma Clair Ictérique Hémolysé, partiellement ou totalement coagulé
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